Cette grande allée en pente douce est le grand axe du jardin.
Située à droite et dans le prolongement de la fontaine du Trident, cette allée plantée de cyprès sous Cosme III traverse le bassin de l'Ile et s'arrète au bout du jardin à la porte Romaine. Beaucoup de sculptures classiques ornent les cotés et croisements des charmilles datant de 1612.
Les labyrinthes qui étaient dissimulés ssur les cotés furent détruits en 1834
